技術(shù)文章
隨著非酒精性脂肪性肝?。?/span>NAFLD)和非酒精性脂肪性肝炎(NASH)成為全球健康挑戰(zhàn),相關(guān)基礎(chǔ)研究熱度持續(xù)攀升。體外細(xì)胞模型是揭示疾病機(jī)制和篩選潛在藥物的關(guān)鍵起點(diǎn)。然而,構(gòu)建穩(wěn)定、可重復(fù)的脂肪肝細(xì)胞模型常面臨操作繁瑣、標(biāo)準(zhǔn)化不足的痛點(diǎn)。本文將解析如何利用標(biāo)準(zhǔn)化試劑盒實(shí)現(xiàn)從造模到檢測(cè)的“一站式"高效服務(wù)。
第一步:精準(zhǔn)模擬病理環(huán)境 - 脂肪肝細(xì)胞模型構(gòu)建試劑盒
核心病理模擬: 該試劑盒的核心是提供生理比例的油酸鈉(模擬單不飽和脂肪酸) 和棕櫚酸鈉(模擬飽和脂肪酸)。這種組合能更真實(shí)地模擬人體內(nèi)高游離脂肪酸環(huán)境,誘導(dǎo)肝細(xì)胞內(nèi)脂滴快速、高效形成。
即用無(wú)憂: 溶液預(yù)先經(jīng)過(guò)0.22μm濾膜過(guò)濾除菌,可直接加入細(xì)胞培養(yǎng)基,省去研究者自行配制、過(guò)濾、除菌的麻煩步驟,避免操作誤差和污染風(fēng)險(xiǎn)。
質(zhì)控保障: 包含溶劑對(duì)照(SW-003),確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性源于脂肪酸本身的作用,而非溶劑影響。
靈活高效: 單盒即可滿足約400次(24孔板規(guī)格)的造模需求。存儲(chǔ)建議分裝(2~8℃保存2周,-20℃保存6個(gè)月),避免反復(fù)凍融保證試劑活性。
第二步:直觀可視化脂滴 - 油紅O染色試劑盒
經(jīng)典染色利器: 造模成功后,需驗(yàn)證細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)積累。油紅O是特異性染色中性脂質(zhì)(如甘油三酯) 的金標(biāo)準(zhǔn)染料,將其染成鮮艷的紅色或橙黃色,便于在普通光學(xué)顯微鏡下直接觀察和拍照記錄。
廣泛適用性: 該試劑盒適用于脂肪肝模型研究中常見(jiàn)的樣本類型:貼壁細(xì)胞、3D類器官、組織冰凍切片、骨髓涂片等(注意:不適用于石蠟切片)。
操作簡(jiǎn)便: 包含優(yōu)化配方的染色液(SW-006)和專用的洗滌緩沖液(SW-007),開(kāi)盒即用,簡(jiǎn)化染色流程。單盒同樣可支持約400次檢測(cè)。
第三步:靈敏定量脂質(zhì)含量 - 尼羅紅熒光檢測(cè)試劑盒
現(xiàn)代熒光定量: 相較于油紅O的定性/半定量,尼羅紅提供了更高靈敏度和定量潛能。這種疏水性染料可嵌入脂滴,發(fā)出強(qiáng)熒光信號(hào)。
兼容平臺(tái): 染色后的樣本適用于熒光顯微鏡觀察和流式細(xì)胞術(shù)分析。流式細(xì)胞術(shù)尤其擅長(zhǎng)快速、客觀地分析大量單個(gè)細(xì)胞的脂質(zhì)含量,進(jìn)行精確的定量比較和分群研究。
靈活選擇: 試劑盒提供Mini Kit (SW-004-1 & SW-005-1, 約200次) 和標(biāo)準(zhǔn)Kit (SW-004-2 & SW-005-2, 約1000次) 兩種規(guī)格,滿足不同通量實(shí)驗(yàn)需求。核心組分Nile Red (1000X濃縮液)需-20℃避光保存,Assay Buffer保存條件相對(duì)寬松。
一站式服務(wù)的核心優(yōu)勢(shì)
無(wú)縫銜接: 三種試劑盒的設(shè)計(jì)(濃度、溶劑、處理流程)充分考慮了彼此間的兼容性。使用模型構(gòu)建試劑盒處理的細(xì)胞,可無(wú)縫對(duì)接進(jìn)行油紅O染色或尼羅紅熒光檢測(cè),無(wú)需研究者額外摸索條件。
標(biāo)準(zhǔn)化與可重復(fù)性: 所有試劑均經(jīng)嚴(yán)格質(zhì)控,提供明確濃度和詳細(xì)說(shuō)明書,減少批次差異和操作者差異,顯著提升實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和可重復(fù)性,這對(duì)多中心研究或長(zhǎng)期項(xiàng)目至關(guān)重要。
高效省時(shí): 省去研究者自行尋找、購(gòu)買、配制、優(yōu)化各種原材料的巨大時(shí)間成本和試錯(cuò)成本。開(kāi)盒即用或僅需簡(jiǎn)單稀釋(如尼羅紅),大幅提升研究效率。
全面解決方案: 覆蓋了脂肪肝體外研究的核心流程:病理環(huán)境模擬 (造模) -> 形態(tài)學(xué)觀察 (染色) -> 定量分析 (熒光檢測(cè)),滿足研究者不同層面的分析需求。
應(yīng)用場(chǎng)景展望:
NAFLD/NASH疾病機(jī)制研究: 探索不同脂肪酸組合、藥物、基因等對(duì)肝細(xì)胞脂質(zhì)代謝、炎癥和纖維化的影響。
藥物篩選與評(píng)價(jià): 高通量篩選潛在的治療脂肪肝或NASH的藥物候選分子,評(píng)估其降脂或保護(hù)肝細(xì)胞的效果。
毒性評(píng)估: 研究環(huán)境毒素或藥物對(duì)肝臟脂質(zhì)代謝的干擾和潛在肝毒性。
基因功能研究: 利用基因編輯技術(shù)(如CRISPR)結(jié)合此模型,研究特定基因在脂質(zhì)代謝中的作用。
在脂肪肝研究需求日益增長(zhǎng)的背景下,標(biāo)準(zhǔn)化、高效、可靠的研究工具顯得尤為重要。蘇州阿爾法生物提供的脂肪肝細(xì)胞模型構(gòu)建試劑盒,搭配油紅O染色和尼羅紅熒光檢測(cè)試劑盒形成的“一站式"解決方案,通過(guò)無(wú)縫銜接、標(biāo)準(zhǔn)化操作、高效省時(shí)的優(yōu)勢(shì),為科研工作者提供了強(qiáng)大的技術(shù)支持。這不僅加速了基礎(chǔ)研究的進(jìn)程,也為藥物開(kāi)發(fā)和毒性評(píng)估提供了更堅(jiān)實(shí)的平臺(tái),最終將助力我們更深入地理解脂肪肝疾病,更快地找到戰(zhàn)勝它的方法。更多詳細(xì)產(chǎn)品信息和 實(shí)驗(yàn)耗材可以進(jìn)入 蘇州阿爾法進(jìn)行了解。
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